肉牛粗饲料霉变毒素检测轻简化技术

肉牛饲用霉变饲料后，健康会受到多方面的影响，霉变饲草会产生多种霉菌毒素，如黄曲霉毒素、呕吐毒素、玉米赤霉烯酮等，具体症状轻重不一：症状轻的表现为食欲下降、日增重下降、料肉比增加、腹泻、生长发育受阻、免疫力降低等；严重的会出现呕吐、胃肠道受损、肝坏死、皮炎肾病综合症等症状；母牛会出现不发情、返情、假性妊娠、流产、死胎、弱仔等；公牛出现雌性化症状。

今天山东鑫旺饲料工业有限公司美女小编介绍一下肉牛粗饲料霉变毒素检测轻简化技术，希望对养牛人有帮助。

一、技术要点

对于霉菌产生的毒素，常用的检测方法有气相色谱法、高效液相色谱法、色谱质谱联用法等。这些方法存在检测仪器和试剂昂贵，检测程序复杂，检测时间长等问题。而抗体技术制备的专用检测试剂盒具有适用性广，快捷、简便，成本低廉，可现场检测等特点。这种检测方法可以初步解决检测成本高、防控技术滞后等问题。

1，检测措施：试剂盒快检技术，半小时出结果。

①样品处理：样品粉碎

②称量样品：称取5g样品于50ml离心管中

③加提取液：使用吸管移取 20mL 70% 甲醇溶液加入到离心管中

④毒素提取：旋涡震荡2min后，静置1~2min

⑤样品稀释：取1ml上清液移取100μL 70%甲醇溶液至 1.5mL 离心管中，再从离心好的上清液中移取 100μL 加入甲醇溶液中，旋涡振荡 30s 混匀

⑥制备样品待测液：从混匀的样品液中移取 100μL 加入稀释液中，旋涡振荡 30s 混匀

⑦试纸条微孔准备：从试剂桶中取出所需要数量的试剂条和微孔试剂，把微孔试剂置于微孔板架上固定

⑧检测液微孔孵育：移取 200μL 样品待检液（2 次 100μL）于微孔中，第 2 次加样后将吸头插入液面下，反复吹打5～8次，孵育3min

⑨判定反应结果：孵育3min后将试剂条 MAX 端向下插入微孔中，层析 7min 后取出试剂条，1min 内判定出检测结果，见图二。

2，脱毒措施：

①吸附式脱毒技术：利用蒙脱石、沸石、硅藻土、膨润土和酵母细胞提取物等组成具有吸附毒素和抑制黄曲霉孢子萌发的双重功效的吸附剂，达到脱霉的目的。牛采食后，毒素与吸附剂经消化道，终排出体外，避免毒素进入血液危害牛的健康。

②酶解式脱毒：利用微生物（枯草芽孢杆菌、酵母菌等）产生的酶作用于霉菌毒素，使其分子结构中的毒性基团被破坏，可降解为无毒代谢产物的过程。这种方法具有安全环保、降解较为彻底、不影响饲料营养价值等优点。

二、技术应用范围：

1、饲料原料采购。采用该检测轻简化技术，可有效帮助农户筛选优质原料，杜绝霉变超标原料入场，同时也减少了农户由于采购劣质原料带来的系列经济损失。

2、仓贮原料霉变检测。采用该检测轻简化技术定期对场内贮存原料进行抽测，可有效降低饲料霉变风险，同时也可以帮助农户对贮存环境和条件进行查漏，以提高农户对原料贮存的管理能力。

3、青贮饲料霉变监测。对青贮原料进行霉变监测，防止发霉变质。

4、TMR日粮霉变监测。采用该技术把控好饲料入口前的一道关。

三、注意事项

1、此操作流程所检毒素检测限为黄曲霉毒素B1：20ppb，玉米赤霉烯酮：200ppb，呕吐毒素1000ppb。

基础检测限黄曲霉毒素B1：10ppb，玉米赤霉烯酮：100ppb 时步骤⑤，不需稀释。基础检测限呕吐毒素：500ppb 时步骤⑤不需稀释。

2、100mL 70%甲醇溶液：70mL 甲醇（分析纯）+30mL 纯水/蒸馏水。

3、试剂条存放于 4～8℃冰箱（冷藏）。

4、检测过程需在 25℃室温下进行。

5、离心机使用时需配平衡。

6、移液器取液时勿平放或倒置。

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汪奕